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以1个桃树杂交后代群体中不同成熟度的桃叶片组织为试材,以商品试剂盒为对照,采用高通量组织研磨机提取DNA的方法,研究了提取试剂、研磨仪使用钢珠大小和震动频率、时间等参数对提取DNA产物产率、质量的影响。
结果表明:在常用的CTAB中添加0.3%的抗坏血酸,并提高PVP浓度至4%,NaCl浓度至12%,能有效解决试剂盒提取过程中出现色素及蛋白质、多糖等杂质问题。
提取方法和研磨方法优化组合,筛选获得高通量提取不同成熟度桃叶片DNA的方法,表明改良的提取方法采用5mm研磨珠、60s、30次/s或5mm研磨珠、60s、25次/s的研磨预处理,不仅省时省工,适用不同成熟度的桃叶片组织,而且提取效果最好,产率最高,质量符合基因组测序要求。
该研究为高效提取DNA提供了技术依据。
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